海南口腔拭子质量商家

时间:2022年03月24日 来源:

    本发明涉及一种快速提取血液和口腔拭子基因组DNA的方法。背景技术:近年来,随着荧光PCR技术的不断成熟。该技术在科研及检验领域得到了应用,成为分子生物学领域不可或缺的一项重要技术。在进行遗传背景分析过程中,血液、唾液和口腔拭子成为重要的生物分析样本。但是,由于血液、唾液和口腔拭子中存在有很多PCR反应物,例如血液中含有血红素,蛋白质,脂肪,抗凝剂等,唾液和口腔拭子含有蛋白质,脂肪,抗凝剂等,使得用血液、唾液和口腔拭子直接进行荧光PCR反应变得尤为困难。因此,现在临床上往往先要从血液、唾液和口腔拭子样本中纯化出DNA,才能进行样本的DNA扩增。提取血液、唾液和口腔拭子基因组的方法种类非常多,传统酚氯仿抽提法,高盐盐析法,模离心柱吸附法,磁珠法,等等。经典的血液核酸提取方法包括几个过程。1.通过低渗液涨破红细胞,将血红素物质释放出来,然后离心,清洗去除血红素。2.通过裂解液裂解白细胞,释放核酸物质。3.通过离心柱或纳米磁珠特异性吸附核酸物质,去除其他杂质。4.通过漂洗液洗掉挂在离心柱或纳米磁珠表面的化学试剂残留和蛋白残留。5.加入洗脱液将核酸从离心柱或纳米磁珠上洗脱下来。 口腔拭子的采样头端的凹陷处折断力大小应该不小于2N。海南口腔拭子质量商家

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    口腔拭子DNA快速提取试剂盒产品简介口腔拭子DNA快速提取试剂盒专门为从口腔拭子刮取的黏膜组织和浸润的唾液中提取基因组DNA而设计,能有效回收>50bp已降解的DNA,包括降解的基因组DNA,线粒体DNA和***DNA等。本试剂盒使用DNA吸附柱-C4回收DNA,**小洗脱体积为10μl。原理:BufferSL与蛋白酶K裂解细胞释放DNA,BufferGBR调整结合条件,***材料选择性吸附DNA,洗涤去除蛋白和盐,低盐溶液洗脱DNA。建议采样方式:使用吸水性强的棉质或无纺布材质的口腔拭子,含口中充分浸润唾液(唾液中DNA含量丰富)在脸颊内测刮10-20次。产品特点试剂盒包含的BufferSL可作为样品保护液(!如使用自备的保护液,请联系技术支持);预期产量为2-5μgDNA/100μl唾液(与拭子材质和采样方式有关);适合处理无纺布和棉质的拭子,不适合处理海绵材质的拭子。

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    下面将结合实施例对本发明作进一步说明。实施例1一种可用于荧光PCR扩增的快速提取全血基因组的方法中的荧光PCR扩增反应液包括浓度或含量和组分如表1。将所述的荧光PCR扩增反应液对血液样本中的管家基因***DH进行荧光PCR扩增,方法如下:将**管颠倒混匀后,吸取100μL血液至,加入200μL的核酸释放剂,涡旋混匀,然后5000g离心30s,弃上清,获得细胞沉淀;然后再加入200μL核酸释放剂,涡旋1min至沉淀完全散开,5000g离心30s,弃上清;向细胞沉淀中加入50μL核酸释放剂,涡旋振荡1min,室温放置5min,12000g离心30s,取上清液即为提取的血液基因组DNA;取上清液3μL,加入到配制好的荧光PCR反应液,于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。所述的荧光PCR扩增程序如下。步骤①:50℃,2min,循环1次。步骤②:95℃,5min,循环1次。步骤③:95℃15s,55℃30s(收集荧光),循环40次。结果分析:平行扩增的荧光定量PCR反应中,阴性对照无扩增,说明反应体系正常,无污染。用本发明处理了10份来源不同的人血液样本,然后用人管家基因***DH引物进行荧光PCR扩增检测,结果如图1所示。 口腔拭子 非常大限度的样本洗脱及转移,对微量DNA样本采集尤为出色。上海口腔拭子价格表

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