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酶标仪的发展历程 酶标仪的前世今生 　　1966年，美国的Nakane和Pierce及法国的Avrameas和Uriel同时报道了以新的标记物——辣根过氧化酶（HRP）替代荧光素，定位组织中抗原的酶免疫组织化学技术（EIH）。1971年，Engvall和Perlmann在酶免疫组织化学的基础上，又发展出一种酶标固相免疫测定技术，即酶联免疫吸附试验（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA），成为继放射免疫分析技术、荧光免疫之后的第三大标记免疫分析技术。70年代中期，随着杂交瘤技术的发展，发明了单克隆抗体制备技术，将其应用于酶免疫测定中，提高了其灵敏度和特异性，使一步法双抗体夹心法等酶免疫测定方法相继出现。 　　酶免疫分析技术是将酶催化的放大作用与抗原、抗体特异性反应相结合的一种微量分析技术。酶标记抗体或抗原后，既不影响抗体或抗原的免疫反应特异性，也不改变酶本身的催化活性，在相应的反应底物参与下，标记的酶水解底物或显色，或使供氢体由无色的还原型转变为有色的氧化型，其有色产物可以通过肉眼、分光光度计或显微镜观察或测定。上海稳赢机电设备的全自动酶标仪可以同时处理多个样品，部分提高了实验效率。北京智能化酶标仪共同合作

微孔板是一种经事先包埋用于放置待测样本的透明塑料板，板上有多排大小均匀一致的小孔，孔内都包埋着相应的抗原或抗体，微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液。 光是电磁波，波长100nm～400nm称为紫外光，400nm～780nm之间的光可被人眼观察到，大于780nm称为红外光。人们之所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收的大部分为红橙光和蓝紫光，但对绿色不吸收，反射出来，所以植物呈现为绿色。酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。 随着检测方式的发展，拥有多种检测模式的单体台式酶标仪叫做多功能酶标仪，可检测吸光度（Abs） 酶标仪从原理上可以分为光栅型酶标仪和滤光片型酶标仪。光栅型酶标仪可以截取光源波长范围内的任意波长，而滤光片型酶标仪则根据选配的滤光片，只能截取特定波长进行检测。山东新型酶标仪价格多少上海稳赢机电设备的全自动酶标仪使用户可以更方便地进行数据整理和分析。

按照滤光方式分类 　　滤光片式酶标仪内置滤光片，根据试验所需选择滤光片来获得不同的波长。光源发出的全波谱光经滤光片后，大部分被过滤，只剩下滤光片本身允许的波长通过。对ELISA来说，检测波长范围是400～750 nm（固定波长：405，450，490，630 nm）可见光范围，即可满足显色测定需求。“单波长”只使用对显色较大吸收的波长测定，目前基本已淘汰。“双波长”除了对较大吸收波长进行测定外，同时用对特异显色不敏感的波长进行校准，OD值为二者之差。选择什么波长主要根据底物溶液颜色和pH值，比如邻苯二胺OPD-过氧化氢H2O2或四甲基联苯胺TMB-H2O2较大吸收波长不同，前者的吸收波长为492 nm，后者为450 nm。对于多功能酶标仪来说，检测波长范围覆盖紫外区、可见光区、近红外等，需要5~6个滤光片。滤光片式酶标仪获得的波长都是固定的，不能获得任意所需波长，而且更换滤光片价格昂贵。

方法: 　　一、滤光片波长精度检查及其峰值测定 　　方法及其衡量的标准：用高精度紫外可见分光光度计(波长精度±0.3nm)对不同波长的滤光片进行光谱扫描，检测值与标定值之差即为滤光片波长精度，其差值越接近于零且峰值越大表示滤光片的质量越好，波长精度越高。 　　二、灵敏度和准确度的监测 　　方法：①灵敏度：配制6ug/ml重铬酸钾(干燥)溶液(0.05mo1/L硫酸溶解)，加入200ul重铬酸钾溶液于小孔杯中，以0.05mo1/L硫酸溶液作空白，于450nm(参比波长650nm)测定，其吸光度应≥0.01A。②准确度：准确配制：1mmo/L对硝基苯酚(提纯品)水溶液，然后以10mmo1/L氢氧化钠溶液25倍稀释之，加入200ul稀释液于小孔杯中，以10mmo1/LNaOH溶液作空白，于405nm(参比波长650nm)检测，其吸光度应在0.4A(0.395～0.408A)左右。上海稳赢机电设备的酶标仪普遍地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中。

酶标仪自检校准 1.外观 酶标仪上应有仪器名称，型号，编号，生产厂家，出厂日期和电源电压；各调节旋钮，按键和开关均能正常工作，外表面无明显机械损伤；显示文字应清楚完整。 2.酶标仪的稳定性(漂移) 选用492nm波长，在吸光度0.0A处，测定标称值为1.0A的光谱中性滤光片(测定操作按仪器说明进行)，记录仪器示值或均值，10min后再次记录仪器示值或均值，前后两次测定值之差不应超过±0．005A。 3.吸光度测定的准确度 选用405，492和620 nm波长，以空气为参比，分别测定标称值为0.5和1.0A的光谱中性玻璃滤光片，用专业测试板代替酶标板，按仪器说明连续测定3次，按下式计算准确度：AA=1/3(A、+A。+A3)—A：(A：为标准值)。上海稳赢机电设备的酶标仪是一种高效、准确的生物检测仪器。广东多功能酶标仪供应商

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　检测步骤 　　1.取固体或液体样品5ml，加入25ml 70%的甲醇，混匀3分钟，静止10分钟，过滤，收集滤液，吸取100ul滤液加100ul分析缓冲液，混匀。 　　2.取出绿色的稀释孔和无色的有抗体包被的稀释孔各放入一个板架上。 　　3.吸取200ul酶联偶合物加入到绿色的稀释孔，再吸取100ul标样(0、2、5、20、50ppb)，和100ul步骤1的待检混合样，混匀3次。 　　4.然后从300ul混合物中吸取100ul加入到无色的有抗体包被的稀释孔中，静止15分钟。 　　5.将孔中的液体倒掉，用蒸馏水冲洗每个孔，将微孔倒置于纸巾上把水吸干。 　　6. 加入100ul底物，放置5分钟，颜色变为蓝色。 　　7. 加入100ul终止液，颜色变为黄色。 　　8. 上机检测，(酶标仪滤镜450nm，示差滤镜630nm) 　　9. 稀释倍数f：1 　　10. 定量限：生奶0.002ug/kg， 　　11. 牛奶或花生酱≤20ug/kg，合格， 　　12. 计算公式：X= c*f北京智能化酶标仪共同合作