苏州正规鼠尾胶原单价

时间:2021年12月29日 来源:

详细步骤如下:1.75%酒精浸泡大鼠尾巴30min;2.将尾巴剪开、去掉皮毛,并剪成小段(3cm左右),抽出银色的尾键;3.把剪碎的尾键置于150ml,0.1%消过毒的醋酸中,4℃放置,并不时振荡;4.48h后取上清,4000转离心30min后,取上清;5.分装上清(鼠尾胶)4度(或-20度)保存。有时可继续向4。中沉淀中加入10-20ml醋酸,重复以上步骤,以制备更多的鼠尾胶。在使用时,先将冰存的胶原液在室温下解冻,再按以下步骤包被培养器皿:1)用吸管吸取胶原液,在无菌的培养器皿的生长面内壁上均匀地涂上薄薄的一层胶原溶液。2)若包被的是培养瓶,可向培养瓶通入氨气或用浸有氨水的棉球封口片刻。让氨气充入瓶内后,即可旋紧瓶盖或塞紧瓶塞。若为培养皿或板的话,可将培养皿或板放在已消毒的饭盒内,将浸有氨水的棉球放入饭盒内,盖紧饭盒盖,四周用封口胶封死。将无组织纤维、脂肪和多糖残留的鼠尾腱,真空冷冻干燥备用。苏州正规鼠尾胶原单价

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一种海狸鼠尾胶原手术缝合线制备方法,其特征在于,步骤如下:(1)胶原纺丝液的配制:将备用的海狸鼠尾筋切成薄片,用无花果蛋白酶进行酶解处理,再用双氧水溶液杀酶;将杀酶后的切片用蒸馏水冲洗,然后用乙酸溶液溶胀,把溶胀后的切片分散搅拌,然后用滤网过滤,除去杂质及不溶胀物,然后把该溶液离心脱泡制得胶原纺丝溶液;(2)手术缝合线纤维的成形:将胶原纺丝液装入立式向上湿法纺丝机的纺丝液贮罐中,用氮气挤压入含有pH=8-11、质量浓度为50-80%的硫酸钠溶液的立式凝固浴中凝固成型,再经过质量浓度为60-90%的乙醇水溶液的脱水浴脱水,再经过假捻器加捻,合股后再进入含有pH=9-11、质量浓度为0.8-1.2%戊二醛的交联浴中交联,经过水浴水洗,再经第二次加捻,除去水及交联剂,干燥后,在卷绕辊上卷绕即得手术缝合线。青岛鼠尾胶原哪家好制备鼠尾胶原:将尾腱置于平皿内剪碎,转移至三角烧瓶中。

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鼠尾胶原实验应用:鼠尾胶原为底物的人鼻腔纤毛上皮细胞培养模式的建立目的建立以鼠尾胶原为贴附底物的人鼻腔纤毛上皮细胞的体外培养模式,为人鼻腔黏液纤毛运输系统的研究提供科学有效的方法.方法制备鼠尾胶原并铺片,以鼠尾胶原为贴附底物组织块培养法培养人鼻腔纤毛上皮细胞,培养7天时进行HE染色及扫描电镜和透射电镜观察细胞形态和结构,应用高速摄像技术测量纤毛摆动频率.结果鼠尾胶原要平坦均匀,平均厚度约为1mm;HE染色可见上皮细胞呈单层向周围爬开;扫描电镜下见纤毛上皮细胞呈不规则多角形,纤毛周围可见微绒毛;透射电镜下可见纤毛上皮细胞间为紧密连接;同一细胞任意两点纤毛摆动频率是相同的;同一来源体外培养的钩突和下鼻甲的纤毛摆动频率是相同的.结论以鼠尾胶原为贴附底物人鼻腔纤毛上皮细胞的体外培养模式的成功建立,为今后研究鼻内用药对纤毛除去功能的影响提供了良好的方法和途径。

一种生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法,其特征在于,包括以下步骤: (1)将无组织纤维、脂肪和多糖残留的鼠尾腱,真空冷冻干燥备用;(2)冻干鼠尾腱经低温冻干粉碎至200?400目; (3)在冰水浴中将粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶胀,鼠尾腱与醋酸的固液比为I克:10mL?I克:120mL,期间不断搅拌,防止冻结成块,得到胶原溶胀液; (4)称取胃蛋白酶加入到胶原溶胀液中,鼠尾腱与蛋白酶质量比为50: I?100: 1,在4°C,48?74小时酶解,期间间歇性搅拌; (5)将黏稠的胶体溶液进行高速冷冻离心处理,收集上清液;在冰水浴中,用的3?6mol/L的NaCl溶液缓慢加入上清液中,不断搅拌至溶液中白色的絮状物不再析出,4°C沉淀10小时,去除上清液,絮状溶液高速冷冻离心处理,收集沉淀。探讨应用鼠尾胶原在豚鼠前庭毛细胞膜片钳实验中的促进毛细胞贴壁效果。

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鼠尾胶原胶凝程序:胶原蛋白I按以下步骤使其pH达到碱性时凝胶。1)将无菌5cm左右的纱布海绵贴在150mm培养皿的盖子上来制备氨蒸气室。用氢氧化铵使纱布饱和,把盖子放在150mm的培养皿上,暂放置一边。2)将胶原蛋白I均匀涂布在要包被物的表面上,厚度可以根据需要改变,胶原蛋白I(50-100μL)足以涂覆22mm的盖玻片。 对于直径100mm的培养皿,每个加入约6mL; 对于60mm培养皿添加约2.3mL,对于35mm培养皿添加约1mL。3)将涂有胶原蛋白的盖玻片或带有盖子的培养皿转移到氨蒸气室并暴露三分钟。4)在无菌蒸馏水中(35mm培养皿加5mL,60mm培养皿加10mL等)浸泡涂布的盖玻片或培养皿30min。吸取原蒸馏水并加0.5-1.0mL无菌蒸馏水,放置在层流罩中过夜。5)吸出蒸馏水,用含血清的平衡盐缓冲液溶液代替并保存在2-8°C。成纤维细胞胶原凝胶复合物有着良好的生物学特性。广州正规鼠尾胶原推荐厂家

鼠尾I型胶原蛋白系采用方法在无菌下制备,纯度达到95%以上。苏州正规鼠尾胶原单价

含细胞的三维胶原的制备(以配制1毫升,1mg/ml三维胶为例):准备好悬浮于培养液的细胞,并放置于冰浴中。将200ul鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中(如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入23ul 10xPBS或10x培养液,混匀(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760ul的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放置20分钟待胶凝固后,加入适当体积的细胞培养液,转移到培养箱中培养。苏州正规鼠尾胶原单价

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