杨浦区酒精肝疾病动物模型建模
球囊拉伤致高脂血症动脉硬化兔模型,实验动物种属:新西兰兔,实验动物环境:SPF级 1、实验方法:用球囊拉伤诱导法。采用3%戊巴比妥钠耳缘静脉注射麻醉,经右股浅动脉,将3.5F球囊扩张导管插至腹主动脉20cm,球囊充液膨胀至2个大气压缓慢拉出,反复3次。球囊拉伤手术后,动物喂以高脂饲料,连续9周,每天给料两次,自由饮水。实验结束后取腹主动脉斑块进行组织病理学检查。2、检测标准:腹主动脉斑块病理镜下可见腹主***程度的改变。动物模型作为人类疾病的缩影。杨浦区酒精肝疾病动物模型建模
诱发性**模型的原理是利用外源性致*因素引起细胞遗传特性异常而呈现出异常生长和高增殖活性,形成**。致*因素主要有化学性、物理性及生物性致*物,而化学性致*物(chemicalcarcinogens)**常见,已确知的多达一千余种,用于诱发实验性**的种类亦很多,如苯并萨,申基胆菌、联苯胺、亚硝胺类、黄曲霉***类。各种致痒物的致*强度、致*谱等特性相差较大,同一种致*物经不同途径给药所致**部位或类型可有很大差异。有些化学性致*物具有明显的亲***或组织特性。因此,实验工作中应根据需要选用适当致*物和致*途径,并确定其他影响因素或实验条件。基本原理:利用外源性致*物引起细胞遗传特性改变,从而出现异常生长和高增殖活性细胞形成**。外源性致*物主要有化学性、物理性(如放射性物质)及生物性(如诱发动物**的病毒),其中以化学性致*物**为常用上海裸鼠疾病动物模型建模广泛应用于药效评价、转化医学等医学前沿领域。
实验期间每天进行阴道涂片,观测动情周期变化。进一步地,检测***水平是指:检测雌***(e2)、促卵泡生长素(fsh)和促黄体生成素(lh)的水平。进一步地,检测对比卵巢重量是指:比较各组大鼠双侧卵巢脏器系数。进一步地,阴道涂片是指:采用阴道脱落细胞涂片法,使用染色剂为亚甲基蓝。本发明利用顺铂成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型奠定了良好的基础。本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。提及的术语和短语如有与公知含义不一致的,以本发明所表述的含义为准。附图说明图1:e2水平检测结果示意图。图2:fsh水平检测结果示意图。图3:lh水平检测结果示意图。图4:大鼠体重检测结果示意图。图5:大鼠卵巢重量统计示意图。图6:动情周期检测(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:动情前期,动情期,动情后期,动情间期。图7:he染色观察不同方法造模对卵泡形态的影响(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:空白组,2mg组,4mg组,6mg组。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步的说明。然而,本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解,在不背离本发明的精神和范围的前提下。
1、动物模型名称:固定制动致制动应激大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雄性4、实验动物年龄:成年5、实验动物体重:180~220g6、实验动物环境:SPF级 。1、实验方法:采用固定制动方法。大鼠每天固定5~6小时进行制动应激,连续制动40天。2、检测标准:模型组大鼠体重增长速度较正常对照缓慢;旷场试验的结果显示,造模结束时与正常对照组比较,模型组大鼠的水平穿越格数、垂直运动次数、理毛时间均减少,**格停留时间、粪便粒数均增加;ELISA的结果显示,造模结束时与正常对照组比较,模型组大鼠CRH、ACTH、CORT含量均明显增高。确定研究疾病目的了解影响疾病发生的内在与外在因素。
即为本发明构建的一种pirb基因敲入的小鼠动物模型。本发明所采用第二种技术方案的特点还在于,步骤1中得到grna1和grna2后分别与trancrrna在25℃孵育10min形成二级结构。步骤3中grna1、grna2的浓度均为2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射浓度为30~100ng/μl。步骤4中southern杂交采用bamhi和avrii核酸内切酶切割f1代杂合子小鼠的dna。本发明的有益效果是:本发明提供了pirb基因敲入的小鼠动物模型及其构建方法,本发明的小鼠动物模型对于pirb基因功能的研究和在体验证提供了良好的基础。分离自pirb基因敲入小鼠的细胞还可以用于研究pirb发挥调节作用的下游机制。通过pirb敲入动物模型与不同类型cre小鼠的杂交,可以用于研究ad不同***或不同细胞类型pirb的调节作用。附图说明图1为本发明pirb基因敲入的小鼠插入pirb基因cds和loxp位点的打靶质粒载体的构建图;图2为本发明pirb基因敲入的小鼠模型的构建方法的流程图;图3为本发明f1代pirb敲入的小鼠的基因型pcr结果鉴定电泳图;图4为本发明f1代pirb敲入的小鼠验证pirb基因敲入效果的测序峰图;图5为本发明f1代pirb基因敲入的小鼠进行southern鉴定的方法示意图;图6为本发明f1代pirb基因敲入的小鼠进行southern鉴定的结果图。人类疾病的动物模型是指各种医学科学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物。疾病动物模型建模优势
早期阶段科学假说与疾病潜在药物治疗效果评价始于小鼠疾病模型构建及其实验室研究。杨浦区酒精肝疾病动物模型建模
1、动物模型名称:高脂饲料致高脂血症大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雄性4、实验动物年龄:成年5、实验动物体重:180~220g1、实验方法:大鼠给予高脂饲料喂养20天。分别于造模前和造模20天**,测定血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量2、检测标准:造模20天后模型组大鼠血清TC、TG、HDLC、LDLC均***增加,与对照组比较具统计学差异。1.提供动物模型构建过程中的原始实验记录及数据图片。2.根据要求提供构建成功的模型动物或相关组织材料。杨浦区酒精肝疾病动物模型建模
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